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原代肠癌完全培养基

肠癌完全培养基是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5% CO2、37℃培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个合适的人源肠癌原代细胞体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌原代细胞的生长。
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使用说明
产品说明

  肠癌完全培养基是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5% CO2、37℃培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个合适的人源肠癌原代细胞体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌原代细胞的生长。

使用说明

  1. 肠癌原代细胞培养

  至少提前半小时使用稀释后的Matrigel基质胶预铺培养瓶/板,使用前吸弃基质胶,用稀释液润洗一遍。将分离并计数后的细胞悬液参考说明书表1中细胞数量接种于培养瓶/板,补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,75%酒精表面消毒后置培养箱,37 ℃ 、5 % CO2培养;原代细胞初次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁),第一次换液建议换半液。

  2. 肠癌原代细胞传代

  镜下观察细胞形成克隆,且汇合度85~95%时即可传代;培养箱中取出细胞,弃旧培养液,0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽,再加入适量0.05%胰酶,37℃孵育,2~5min后拿出轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况;细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,1500 rpm,3 min;弃上清,以1~5 mL条件培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板,(不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量详见说明书),补加培养基至所需体积,十字交叉混匀,培养容器75%表面消毒后置37 ℃ 、5 % CO2培养箱培养。其他步骤同上。

关键词:
原代肠癌完全培养基
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