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    组织消化酶二.pdf

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组织消化酶 II

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货号:
PRS-TDE-Ⅱ
产品特性:

◎ 成功率高,整体成功率超过85%

◎ 使用便捷,随用随买,质量保证

◎ 可以维持细胞长期培养

◎ 保持细胞原始病理特性

数量
-
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产品说明
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使用说明
产品说明

本产品包含各种酶法组织消化中常用的胶原酶等蛋白酶,能特异性地降解胞外胶原蛋白,使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离,而不损坏细胞表面结构的完整性。使用本产品进行组织消化可以使组织中细胞间的桥连结构松动,使组织由块状变成絮状,经过机械吹打后制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液。制备的细胞悬液可用于原代培养、流式细胞仪进行细胞生物学(如凋亡、增殖、细胞周期等)研究。适用范围:各种正常乳腺和乳腺肿瘤组织,从中分离得到原代细胞,包括上皮细胞,间质细胞,成纤维细胞等。

使用说明

-20℃避光保存6个月内有效。

(1)提前将消化酶从-20℃冰箱取出置于2-8℃融化;

(2)将冰盒表面消毒后移入超净台内。在无菌条件下,冰上在培养皿中将组织样本置于组织清洗液内清洗3~5 s。

(3)在无菌条件下,将清洗后的组织样本浸没在盛有10 ml组织清洗液的培养皿中。冰上采用无菌手术刀将样本机械切割成1~2 mm3大小后,将样品碎块转移至50 mL无菌离心管中; 

(4)加入10~20 mL组织清洗液于离心管中,1200 rpm 4℃离心5 min;

(5)弃上清,加入10~30 mL本消化酶(消化酶体积至少为组织体积的5倍),标记样本名称及编号并用封口膜封口,放入恒温振荡培养箱中消化,设置参数37 ℃、100~200 rpm(根据样本质地设置转速),待组织消化至出现团絮状(一般1小时左右),即可终止消化;

(6)取出消化好的样本,加入5 mL含血清DMEM培养基,100 μm细胞筛网过滤。

(7)将过筛后的细胞悬液于350 g常温离心5 min。

(8)弃上清后,细胞沉淀加入原代细胞培养基待用。 

注意事项

1. 本产品常规在-20℃保存。使用前需在2-8℃融化,融化后需在一周内使用完毕。

2. 使用本产品时应注意无菌操作,避免污染。

3. 为保持本产品的最佳使用效果,一般在37℃条件下使用,根据具体实验情况也可在2-8℃条件下使用。

4. 本产品的消化时间需要根据样品大小进行摸索,对于珍贵样品,为达到最佳的分离效果,可采用二次分步消化方式(即将首次消化的组织残渣收集后,重复如上操作步骤1~8)。

5. 请于保质期内使用本产品,超出保质期后,将无法达到理想的使用效果。

6. 本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。

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