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本产品包含各种常用的蛋白酶,能特异性地降解胞外胶原蛋白,使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离,而不损坏细胞表面结构的完整性。使用本产品进行类器官消化可以使类器官细胞间的桥连结构松动,使类器官变得松散,经过机械吹打后制成细胞群团悬液。制备的细胞悬液可用于类器官扩大培养、流式细胞仪进行细胞生物学(如凋亡、增殖、细胞周期等)研究。适用范围:各种类型的类器官。
2-8℃避光保存1个月内有效;-20℃避光保存6个月内有效。
(1)去除类器官培养板中的培养基,加入1 mL预冷PBS吹打基质胶,反复3-5次;
(2)将悬液转移至15 mL离心管中,1500 rpm 常温离心5 min;
(3)小心吸去上清和基质胶层,可重复加入预冷PBS吹打,离心,最大程度去除基质胶。
(4)弃上清,加入5-10 mL解离试剂,封口后放入恒温振荡培养箱中消化,设置温度37 ℃、转速200~300 rpm(根据类器官大小设置转速),注意镜下检查类器官消化情况,类器官消化成多细胞团块为宜;
(5)取出消化好的样本,1500 rpm 常温离心3 min。
(6)弃上清后,加入6 mL含血清培养基进行终止消化,1500 rpm 室温离心3 min。
(7)弃上清后加入稀释液待用。
注意事项
1. 使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
2. 为保持本产品的最佳使用效果,一般在37℃条件下使用,根据具体实验情况也可在 2-8℃条件下使用。
3. 请于保质期内使用本产品,超出保质期后,将无法达到理想的使用效果。
4. 本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。
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